Développement et validation d’un système rapporteur pour l’étude des sites de contact inter-organites
Langue Français
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Modalités de diffusion de la thèse :
  • Thèse confidentielle jusqu'au 15/06/2027.
  • Thèse avec 2 versions : seule la version intégrale est proposée ; sur authentification (communication intranet).
 
Auteur : Huver, Sophie
Date de soutenance : 15-06-2026

Directeur(s) de thèse : Tomasetto, Catherine-Laure - Alpy, Fabien

Président : Gasman, Stéphane
Rapporteur(s) : Boncompain, Gaëlle - Mesmin, Bruno
Membre(s) du jury : Dezi, Manuela

Établissement de soutenance : Strasbourg
Laboratoire : Institut de génétique et de biologie moléculaire et cellulaire (Strasbourg)
École doctorale : École doctorale des Sciences de la vie et de la santé (Strasbourg ; 2000-....)
 
Discipline : Biologie cellulaire et moléculaire
Classification : Sciences de la vie, biologie, biochimie

Mots-clés libres : Sites de contact membranaires, Réticulum endoplasmique, Endosomes tardifs /lysosomes, Système rapporteur, DdFP, STARD3, VAPs, Homéostasie du cholestérol
Mots-clés :
  • Membranes (biologie)
  • Réticulum endoplasmique
  • Homéostasie
  • Organites -- Formation
Résumé : Les sites de contact membranaires (SCM) entre le réticulum endoplasmique (RE) et les endosomes tardifs/lysosomes (ET/lys) jouent un rôle essentiel dans l’homéostasie lipidique, le trafic intracellulaire et l’organisation du compartiment endo/lysosomal. Toutefois, leur étude dynamique en cellules vivantes reste limitée par le manque d’outils adaptés. Au cours de cette thèse, nous avons développé et optimisé un rapporteur fluorescent basé sur la technologie ddFP (Dimerization-Dependant Fluorescent Protein), nommé LELYS-ER, permettant de visualiser et quantifier une sous-population de contacts entre le RE et les ET/lys en cellules vivantes. L’établissement de ce système a permis de mettre en évidence la plasticité de ces interfaces ainsi que leur sensibilité à des perturbations biophysiques, lipidiques et moléculaires. L’analyse de protéines impliquées dans ces contacts, notamment STARD3, VAPA, VAPB, MOSPD2 et ORP1L, soutient un modèle d’organisation modulaire et partiellement redondant, dans lequel plusieurs protéines d’ancrage et de transfert lipidique contribuent à la stabilité des interfaces détectées. La transférabilité de cette approche à d’autres contacts, illustrée par le développement des rapporteurs MITO-ER et PLASM-ER, souligne le potentiel du système ddFP comme outil pour l’étude comparative des SCM. Enfin, l’analyse de l’interaction PTPIP51-VAPB au niveau des contacts RE-mitochondries suggère une organisation multimodulaire impliquant les motifs FFAT de PTPIP51, avec une possible implication du domaine coiled-coil. Cette thèse propose ainsi une nouvelle approche pour l’étude dynamique des contacts inter-organites en cellules vivantes et soutient l’hypothèse selon laquelle l’organisation des contacts RE-ET/lys dépend à la fois des propriétés biophysiques des membranes, de l’homéostasie lipidique et du recrutement local de protéines d’ancrage spécialisées.
 
Type de contenu : Text
Format : PDF
 
Entrepôt d'origine : STAR : dépôt national des thèses électroniques françaises
Identifiant : 2026STRAJ031
Type de ressource : Thèse